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Alexandre LALO

TOULOUSE

En résumé

Biologie moléculaire :
• Clonage : Design d’amorces, Topo cloning, Gateway, PCR, Digestion enzymatique, Purification, Ligation.
• Transformation et Transfection : Bactérie (choc thermique, électroporation), Levures (transformation de librairie peptidique, scale up), Cellules humaines, Cellules végétales (agro-infiltration).
• Préparation échantillons : Extraction d’ADN (ADN génomique et plasmidique) et d’ARN, Purification de plasmides et d’amplicons.
• Analyse et modification : Electrophorèse sur gel agarose, PCR, RT-PCR, Southern blot, Mutagenèse dirigée, Optimisation de plasmide.

Biochimie des protéines :
• Test d’interaction : Double hybride en levure et en cellules humaines (protéine / peptide), Phage display (protéine / sucre).
• Préparation échantillons : Extraction protéique, Dessalage, Lyophilisation, Préparation de paroi de cellules végétales, Digestion enzymatique (Trypsine et Chymotrypsine).
• Purification de protéines : Utilisation de système de pilotage FPLC (AKTA), Chromatographie échangeuse d’ions, Chromatographie d’affinité (colonne de Nickel, colonne de Phényl Boronate, colonne de Lectine), Réalisation et utilisation de colonne d’immuno-affinité, Précipitation sulfate d’ammonium.
• Analyse : Electrophorèse sur gel acrylamide (Coomassie et Nitrate d’argent) et Western blot, Dosage protéique (ELISA, Coomassie, Acide Bicinchoninique).
• Protéomique : Spectrométrie de masse (MALDI-TOF).

Biologie cellulaire :
• Culture : Cellules Humaines, Cellules Végétales, Levures, Bactéries (E.coli et agrobactérie).
• Préparation et Test : Fractionnement cellulaire, Immunofluorescence couplé à de l’hybridation in situ en fluorescence (IF-FISH), Test de transactivation de protéines en levure, Utilisation de système réplicon du virus de l’Hépatite C (HCV).

Bio-informatique :
• Construction plasmidique : Vector NTI, Serial Cloner, Oligo Analyzer.
• Analyse de séquençage ADN : BioEdit, Blast.
• Pilotage de système FPLC : Unicorn.
• Logiciel de protéomique : Data Explorer et Protein Prospector.

Projet ANR :
• Suivi de projet multi-partenarial.
• Présentation de résultats.
• Participation à la préparation de rapports intermédiaires.

Encadrement :
• Stagiaire M1, de Novembre à Décembre 2011 et de Novembre à Décembre 2012.
• Encadrement technique, réalisation et suivi du projet.

Responsabilités Techniques :
• Responsable des appareils FPLC du Laboratoire de Recherche en Science Végétale (LRSV),

Vie de laboratoire :
• Participation à des réunions de groupe
• Participation à des séminaires de laboratoires


Mes compétences :
Protéomique
Biologie moléculaire
Biologie végétale
Biochimie des protéines

Entreprises

  • CNRS (Université Paul Sabatier) - Ingénieur d'étude

    2011 - maintenant Production et purification de protéines lectines pariétales de cellules végétales dans le cadre du projet Wallarray II -
    Contrat de 2 ans dans le cadre d’un projet ANR (Wallarray II) au sein de l’équipe « Protéines Pariétales et Développement » du LRSV permettant de développer et mettre au point des puces oligosaccharidiques de parois de cellules végétales en utilisant la technologie SPRi (Surface Plasmon Resonance Imaging) dans le but d’étudier des interactions protéines / sucres

  • Vivalis - Département « Drug Discovery », Stage de fin d'étude (Master 2 Professionnel)

    Roussay, 2010 - 2010 Création d’une plateforme de criblage 3D-Screen de la protéine NS5A du virus de l’hépatite C -
    Stage de fin d’étude de Master 2 de 7 mois dans la société Vivalis à Nantes au sein du département « Drug Discovery » permettant de mettre en évidence des inhibiteurs conformationels spécifiques de protéines en utilisant une adaptation originale du système double hybride en levures et cellules humaines.

  • IPBS-CNRS - Stagiaire , équipe de « Radiobiologie et Réparation de l’ADN » du professeur Bernard Salles

    2009 - 2009 Etude du rôle de phosphorylations dans les fonctions de la protéine télomérique TRF2 - Stage de 4 mois à l’IPBS dans le cadre du Master 1 au sein de l’équipe de « Radiobiologie et Réparation de l’ADN » du professeur Bernard Salles.

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