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Stéphane KERBRAT

CHAMPIGNY SUR MARNE

En résumé

Cytométrie en flux
Cyan et logiciel Summit (Beckman Coulter), LSR Fortessa X20 et logiciel BD FACSDiva (BD Biosciences), logiciel FlowJo. Tri cellulaire sur Influx (avec l’aide du personnel de la plateforme du site). Analyse de la production d’espèces réactives de l’oxygène par les différentes sous-populations de lymphocytes T CD4+ Treg/Th17/non Th17 (marquages 5 couleurs et sondes DHE, H2DCF-DA, MitoSox), analyse en cytométrie en flux des sous-populations leucocytaires inclues dans le parenchyme pulmonaire et dans les espaces alvéolaires (marquage 6 couleurs), mesure du nombre de divisions cellulaires (CFSE), apoptose (Annexin-V/Iodure de propidium). Formation cytométrie en flux niveau 2, service formation continue de l’université Pierre et Marie Curie (UPMC), 22-26 mars 2010. Formation cytométrie en flux Beckman Coulter, 20-21 octobre 2009. BD Horizon Tour, 19 mai 2016

Immuno fluorescence
Développement d’un protocole permettant d’observer la localisation sub-cellulaire de ERK1/2 et de phospho-ERK1/2, étude de l’expression du marqueur de sénescence p16INK4a dans les lymphocytesT CD4+ Treg/Th17/non Th17 triés par cytométrie en flux, observations en microscopie à fluorescence

Biologie moléculaire
Extraction d’ARN totaux, reverse transcription, design de primers (logiciels Primer Express, Primer Blast, Light Cycler Probe Design), RT-PCR quantitative [RT-qPCR] (ABI Prism 7000 et 7900 Applied, Roche Light Cycler), mutagénèse dirigée et production de plasmides, mesure de l’activité transcriptionnelle sur un luminomètre (mesure de l’activité transcriptionnelle sur un luminomètre)

Biochimie
Préparation d’extraits protéiques totaux, cytoplasmiques et nucléaires, western-blot, analyse fonctionnelle de la région 5’ du promoteur de GILZ et de sa régulation

Culture cellulaire
Préparation d’extraits protéiques totaux, cytoplasmiques et nucléaires, western-blot, analyse fonctionnelle

Expérimentation animale
Gestion et génotypage de l’élevage de souris PEA-15-/-. Isolement cellules monocytaires rates/ganglions. Emphysème expérimental (instillation intratrachéale, recueil bloc « cœur-poumons »)

Langues
Anglais courant lu, écrit et parlé + Anglais à usage professionnel et technique

Mes compétences :
Cytométrie en flux
Immunofluorescence
Expérimentation animale
Biologie moléculaire
Biochimie
Culture cellulaire

Entreprises

  • Université Paris Est Créteil - Technicien de recherche et formation classe supérieure

    2009 - maintenant • « L’exposition à la fumée de cigarette induit la sénescence des lymphocytes T CD4+ Th17 humains» (Sujet du doctorat)
    • « L’absence de PEA-15 est associée à une modification de la production des cytokines Th par les lymphocytes T CD4+ activés in vitro, et une réponse allo-immune contre les globules rouges déficiente in vivo »
    • « Rôle de PEA-15 dans les anomalies immunologiques observées au cours de l’emphysème expérimental »

  • Pôle de Recherche Biologique, Hôpital H. Mondor Créteil - Assistant de recherche Clinique

    2008 - 2009 Dans le cadre du PHRC KIRs, cellulothèque, Pôle de Recherche Biologique, Hôpital H. Mondor Créteil :
    Congélation sanitaire de prélèvements sanguins de patients atteints de lymphome T cutanés (mycosis fongoïde et syndrome de Sézary). Gestion informatique des collections de prélèvements congelés.

  • Université Paris Est Créteil (UPEC), INSERM U841 Créteil, Immunologie Oncologie Dermatologie - Technicien de recherche et formation,

    2004 - 2009 • « Mécanismes d’activation des lymphocytes T au cours des syndromes de nécrolyse cutanée induits par une réaction d’hypersensibilité retardée à certains médicaments
    • « Test sanguin de proliferation lymphocytaire au Beryllium (BeLPT) ». Adaptation pour le laboratoire d’Immunologie Biologique de l’hôpital Henri Mondor du test T.T.L. au Beryllium, d’une méthode statistique de calcul pour la validation clinique des T.T.L, et constitution d’une base de données de patients sains « référence »
    • «Caractérisation d’une sous-population de lymphocytes T exprimant la molécule CD90»
    • « Sensibilité à la cytotoxicité des lignées lymphoïdes et colorectales »

  • UPEC, laboratoire d’Immunologie Biologique Hôpital H. Mondor Créteil INSERM U841 Créteil - Technicien de recherche et formation

    2003 - 2004 « Etude moléculaire et fonctionnelle de l’activation des lymphocytes T dans des pathologies humaines »

  • Université Paris XI, INSERM U461 Châtenay Malabry - Adjoint technique de la recherche

    2001 - 2003 U461 « Récepteurs et signalisation des interleukines »
    • « Effet des glucocorticoïdes et de l’IL-2 sur l’expression de GILZ dans les lymphocytes T»
    • « Mécanismes d’activation des cellules dendritiques par les haptènes chimiques »

Formations

  • Université Paris Est

    Creteil 2013 - 2016 Docteur d'université

    Doctorat en sciences du vivant de l’institut des sciences et industries du vivant et de l'environnement (AgroParisTech), soutenu le 10 novembre 2016, université Paris-Est, école doctorale ABIES.
    Le tabagisme aggrave de nombreuses maladies inflammatoires chroniques (BPCO, maladie de Crohn, arthrite rhumatoïde, psoriasis) associées à la sous-population de lymphocytes T CD4+ (LT CD4+) inflammatoires

  • UPMC

    Paris 2011 - 2012 Master de Sciences et Technologies

    Mention Biologie Moléculaire et Cellulaire, Spécialité Immunologie (M2), Université Pierre et marie Curie (UPMC), Paris VI (mention bien)

  • IUT

    Creteil 2004 - 2004 Certificat en expérimentation animale niveau II

  • Université Rennes 1

    Rennes 2000 - 2001 Maîtrise de Biochimie

    option biologie cellulaire et immunologie

  • Université Rennes 1

    Rennes 1999 - 2000 Licence de Biochimie

    option biologie cellulaire

Réseau

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