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Nicolas DOUSSIET

AUBAGNE

En résumé

Je recherche un emploi dans la région PACA, Rhône Alpes ou Languedoc-Roussillon , titulaire d'un Master 2 Bio ingénierie Alimentaire et des Environnements, je suis spécialisé en Diagnostic et traçabilité des Environnements Chimiques et Biologiques.
Je voudrai travailler comme ingénieur d'études en recherche et développement dans le domaine de la santé ou de l'environnement.

Mes compétences :
Organisation
Manipulations
Culture cellulaire
Autonomie
Rédaction
Communication orale
Analyse de données
Statistiques +logiciel R
Microsoft Office
Biologie moléculaire
Bonnes Pratiques de Fabrication
Microbiologie
Bonnes Pratiques de Laboratoire

Entreprises

  • Sartorius Stedim Biotech  - Technicien Contrôle Qualité Produits Finis

    AUBAGNE 2016 - 2016 -Réalisation de la réception et de l'enregistrement des produits finis afin de les analyser par des méthodes microbiologiques selon les procédures et le respect des BPL , BPF et BPD.
    -Contrôles environnementaux (Salles Blanches de production, Salle de stérilité, Hotte Bioburden), filtrations sur membranes, dénombrements microbiens, validation de nettoyage, qualification des appareils et vérification périodiques, test LAL, test de stérilité, comptage particulaire dans l'air et dans les liquides et contrôles des surfaces (boîtes contacte).
    -Constitution des dossiers d'analyses.
    -Approvisionnement de mon poste de travail.
    -Formation et qualification des nouveaux entrants au poste.

  • CIRAD UMR Qualisud - Assistant ingenieur en recherche et développement

    2015 - 2015 Objectif: Vérification et caractérisation par microbiologie et par des méthodes de biologie moléculaire pour confirmer l’identification de moisissures aflatoxinogènes isolées de la noix du Brésil.

    • Recherche d’information technique et spécifique au projet sur des publications et revues (science direct, NCBI, pub Med)
    • Rédaction des protocoles
    • Organisation du plan de travail
    • Participation aux réunions projet

    • Préparation des commandes de consommable et de réactif
    • Réalisation des tests biologiques :
    o Culture de mycélium sous hotte à flux laminaire.
    o Préparation des milieux de culture spécifique AFPA, CYA et MEA.
    o Ajustement du ph des milieux.
    o Stérilisation à l’autoclave.
    o Caractérisation macroscopique sur milieu gélosé (diamètre, pigmentation du mycélium, plissage à l’envers des colonies).
    o Cryoconservation par la technique MAST et au glycérol au -80°c
    Extraction physico-chimique de l’ADN (lyse cellulaire de façon mécanique, extraction chimique par solvant), également par extraction avec le kit FastDNA spin
    Identification des moisissures par PCR, par séquençage et PCR-DGGE, vérification de la spécificité, quantification, exactitude des résultats).
    • Résolution des problèmes techniques (modification de la méthode ou lancer une nouvelle méthode d’analyse)
    • Formation des nouveaux utilisateurs aux techniques mises en place.
    • Rédaction du cahier de laboratoire
    • Faire part des évolutions du projet à mon responsable (résultats et manipulation)
    • Traitement des résultats bruts dans un fichier Excel (séquence d’ADN)
    • Mise en forme des résultats sous forme de graphique.
    • Sens critique, d’analyse et de synthèse.
    • Rédaction d’un rapport technique
    • Présentation oral
    • Vérification des cahiers de vie des équipements (historique, maintenance, qualification)
    • Participer à l’amélioration continue de la qualité au sein du laboratoire

  • INRA Laboratoire de Biotechnologie de l'Environnement - Assistant d'ingenieur en recherche et développement

    2014 - 2015 Objectif: Fractionnement de la matière organique (boue de station d’épuration, compost de boue) par extraction chimique. Analyse de la bio- accessibilité et des micropolluants (Fluorimétrie 3D, ASE, HPLC).

    o Manipulation
    • Préparation des commandes de consommable et de réactif
    • Réalisation des tests physico-chimiques :
    o Extraction chimique par traitement Acido-basique (NaOH + H2SO4) de matière organique (herbe, cyprès, compost, digestat, steack haché)
    o Analyse de la bio- accessibilité et des micropolluants : Extraction accélérée par solvant (ASE), HPCL et chromatographie en phase gazeuse (CPG).
    o Titration du pH de la matière organique.
    o Calcul de la matière sèche (105°C) et matière volatiles (550°C)
    o Demande Chimique en Oxygène (DCO) avec le kit de mesure en tubes Vario MR et lecture du tube par un spectromètre MultiDirect AL250
    o Fluorimétrie 3D avec un Perkin Elmer LS55 avec les longueurs d’ondes entre 200 et 600nm
    o Dosage des sucres totaux par la méthode de Dubois, lecture spectrométrique à 490nm
    o Dosage des protéines par la méthode de Lowry, lecture spectrométrique à 750nm
    o Réalisation de gamme étalon de 0 à 100 mg.L-1de glucose et de SAB
    • Résolution des problèmes techniques (modification de la méthode)
    • Formation des nouveaux utilisateurs aux techniques mises en place.

    • Rédaction du cahier de laboratoire
    • Faire part des évolutions du projet à mon responsable (résultats et manipulation)
    • Traitement des résultats bruts dans un fichier Excel (matière sèche, volatile, DCO, HPLC et fuorimétrie)
    • Mise en forme des résultats sous forme de graphique.
    • Sens critique, d’analyse et de synthèse.
    • Rédaction d’un rapport technique
    • Présentation oral
    o Publication: Jimenez, J., Aemig, Q., Doussiet, N., Steyer, J.-P., Houot, S., Patureau, D., 2015. “A new organic matter fractionation methodology for organic wastes: Bioaccessibility and complexity characterization for treatment optimization. Bioresour. Technol. 194, 344–353”.

  • INSERM U1046 Physiologie et Médecine Expérimentale du Coeur et des Muscles - Technicien de laboratoire

    2011 - 2013 Objectif: Recherche de protéines et d’ARNm présents dans des cellules musculaires et adipeuses humaines chez des volontaires Insulinorésistant et Insulinosensible. Identification des protéines en Western Blot, des ARNm par qPCR. Marquage de protéine sur des coupes de tissus humains et analyse au microscope à fluorescence.

    o Manipulation
    • Préparation des commandes de consommable et de réactif
    • Réalisation des tests biologiques :
    o Prélèvement par un chirurgien des échantillons musculaire et adipeux par biopsie à l’aide d’une aiguille de Bergström de patient insulinorésistant et insulinosensible à l’hôpital, traitement et transfert des échantillons jusqu’au laboratoire dans l’azote liquide.
    o Réalisation des coupes musculaire et adipeuse de 10µm au cryostat et marquage immunofluorescence à l’aide d’anticorps anti-myosine, anti-CD68 et avec des anticorps secondaires fluorescent (Alexa fluor)
    o Mise en culture des cellules dans du milieu SVF-DMEM dans un laboratoire de niveau de sécurité P2.
    o Séparation des protéines en western blot par électrophorèse en gel de polyacrylamide (SDS-PAGE), visualisation des protéines par des anticorps primaires spécifiques et un anticorps secondaire fluorescent observé par un scanner (Odyssey–LI-COR).
    o Extraction de l’ARN.
    o Reverse transcription en utilisant un kit Thermo Scientific Verso cDNA Synthesis.
    o Quantification des gènes par qPCR à l’aide du Ligth-Cycler 480 (Roche).
    o Utilisation de bain marie, centrifugeuse,
    • Formation des nouveaux utilisateurs aux techniques mises en place.
    o Rédaction
    • Rédaction du cahier de laboratoire
    • Faire part des évolutions du projet à mon responsable (résultats et manipulation)
    • Traitement des résultats bruts dans un fichier Excel (résultat des CT du lightcycler 480, test statistique)
    • Mise en forme des résultats sous forme de graphique.
    • Sens critique, d’analyse et de synthèse.
    • Rédaction d’un rapport technique
    • Présentation oral

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