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Sébastien BANQUET

Paris

En résumé

Anesthésie et prélèvements de sang et d’organes chez différentes espèces (souris, rat, porc).

Modèle d’angiogénèse in vivo : Matrigel plug assay.

Fonction vasculaire ex-vivo : Technique d’isolement de petites artères (pulmonaire) avec montage sur myographe de Mulvany.

Biologie cellulaire : Culture de lignées cellulaires (cellules tumorales, endothéliales, musculaires lisses et fibroblastes) et primo-cultures de cellules issues de différentes espèces (cellules endothéliales d’aorte, coronaires de porc et de souris diabétique). Transfection de cellules tumorales adhérentes par la technique du phosphate de calcium. Migration de cellules endothéliales et musculaires lisses par la technique du Boyden chamber assay. Prolifération cellulaire analysée par le Counter coulter, essai colorimétrique (MTT, WST-1) et cytométrie en flux.

Biologie moléculaire : Extraction d’ARN à partir de cellules ou de tissus frais pour des analyses par PCR, RT-PCR semi-quantitative et en temps réel (Roche LightCycler). Construction de différents plasmides (clonage) puis vérification sur gel d’agarose. Western-Blot de protéines phosphorylées ou non (molécules impliquées différentes voies de signalisation (Akt, MAPK…), facteurs de croissance et leurs récepteurs (FGF-2, VEGF…), eNOS…). Zymographie de métalloprotéases (MMPs). Co-immunoprécipitation. siRNA (dirigé contre Rac1…) sur cellules adhérentes.

Biochimie : Dosage par ELISA de facteurs de croissance. Enzymologie (activité eNOS, dosage de bioptérines, GMPc…) par l’utilisation de radioéléments et de l’HPLC.

Imagerie : Coupes de tissus frais (tumeurs, tissu adipeux, cœur) par le cryostat ou coupes en paraffine. Analyse du réseau vasculaire dans ces différents tissus par microscopie optique, à épifluorescence ou confocale. Analyse de l’incorporation et de la localisation de facteurs de croissance dans des microcapsules d’alginate par microscopie confocale. Mesure du flux calcique et du stress oxydant cytosolique et intra-organelles (mitochondrie et réticulum endoplasmique) dans des cellules primaires endothéliales d’aorte et de coronaires de porc et de souris diabétiques par microscopie à épifluorescence.

Mes compétences :
Polymères
Stress Oxydant

Entreprises

  • Actelion - Research scientist in drug discovery

    Paris 2013 - maintenant

  • Servier - Cadre Post-Doctoral

    Suresnes 2011 - 2013 Projet: Dans différents modèles de dysfonction endothéliales, étude de l’impact du stress oxydant induit par le découplage de la NOS3 sur l’homéostasie calcique dans le cas du diabète:

    Modèles de dysfonction endothéliale: cellules endothéliales primaires d'aorte et de coronaires de porc ainsi que de cellules endothéliales d'aorte issues de souris diabétiques

    - Mesure du flux calcique cytosolique et intra-organelles (mitochondrie et réticulum endoplasmique) par microscopie à épifluorescence.

    - Mesure également de la production de radicaux libres (ex: anion superoxyde) par microscopie à épifluorescence.

  • Karolinska Institutet (Stockholm, Suede) - Doctorant

    2011 - 2011 Pour la preparation de mon doctorat europeen, je suis parti au Karolinska Institutet (avril-aout 2011) dans le laboratoire du Professeur Yihai Cao pour approfondir mes connaissances dans le domaine de l'angiogénèse.

    Projet: Participation a différentes études portant sur l'angiogenese tumorale et l'angiogénèse impliquée dans l'obésité.

  • INSERM U885 «Physiopathologie de la réactivité bronchique et vasculaire», Bordeaux 2 - Stagiaire Master 2

    2007 - maintenant Projet: Déterminer le rôle du récepteur beta2-adrénergique dans l'hypertension artérielle pulmonaire.

    Domaine d’expertise : physiopathologie vasculaire.

    Distinction: Bourse au mérite pour la préparation du master 2

    Publications: Leblais V et al, Cardiovasc Res (2008) 77(1):202-10.
    Banquet S et al, Cell Signal (2011) 23(7):1136-43.

  • INSERM U644, « Pharmacologie des dysfonctionnements endothéliaux et myocardiques », Rouen - Doctorant

    2007 - 2011 Thèse: "Développer de nouvelles stratégies thérapeutiques pour revasculariser le myocarde dans l'insuffisance cardiaque". (Dir de thèse: Pr Christian Thuillez et Dr Ebba Brakenhielm).

    Domaines d’expertise : physiopathologie cardiovasculaire, angiogenèse, polymères.

    Compétences :
    - Recherche de collaborations nationales (CNRS 2234 Reims, CNRS 4045 Toulouse) et internationales (Karolinska Institute, Stockholm, Suède)
    - Rédaction de rapport scientifique annuel et recherche de financement
    - Organisation et planification des tâches
    - Encadrement de stagiaires (BTS, master)
    - Enseignement (TP biochimie, 2ième année pharmacie)

    Distinctions:
    - Prix de Thèse de la Nouvelle Société Française d'Athérosclérose FRUIT D'OR PRO-ACTIV 2012
    - Bourse de fin de thèse de la Fondation de la Recherche Médicale (FRM), 2010-2011
    - Prix de la meilleure communication orale lors de la journée de l'IFRMP23, Rouen, France, 2010
    - Keystone Symposia scholarship (Keystone, Colorado, USA) décerné par les Drs Mickael Simons et William C Sessa, 2010.
    - Prix SGAM 2008, "Innovations thérapeutiques en cardiovasculaire" (Remise du Prix au Sénat)
    - Prix du meilleur poster lors du 1er congrès d'Angiogenèse, Chantilly, France, 2008.
    - Bourse doctorale ministérielle (MRT, 2007-2010)

    Publications:
    - S Banquet et al. Circulation. 2011 Aug 30;124(9):1059-69.(Impact Factor: 14,8)
    - 1 revue en cours de rédaction (1er auteur)
    - 1 brevet européen déposé par Inserm transfert

  • INSERM U889, "Fibrose hépatique et cancer du foie", Bordeaux 2 - Stagiaire Master 1

    2006 - maintenant Projet : Déterminer le rôle de Rac1 dans l’expression et la sécrétion de métalloprotéases de type 2 dans des cellules d’hépatocarcinome humain.

    Domaine d’expertise : biologie tumorale

  • UMR CNRS 5234, - Stagiaire volontaire

    2006 - maintenant Projet : Elaborer des constructions moléculaires pour la délétion de deux gènes impliqués dans la voie de biosynthèse du tryptophane et de la leucine chez Candida lusitaniae.

    Domaine d’expertise : biologie moléculaire (clonage, séquençage).

  • INSERM U889, "Fibrose hépatique et cancer du foie", Bordeaux 2 - Stagiaire volontaire

    2005 - maintenant Projet : Déterminer l’expression de la protéine arginine N-méthyltransférase de type 7 et rechercher ses partenaires protéiques dans des cellules d’hépatocarcinome humain.

    Domaine d’expertise : biologie tumorale

Formations

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