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Marilyn LEPLEUX

BORDEAUX

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En résumé

Mes compétences :
Neurosciences
Microscopie à épifluorescence
Microscopie à balayage
Analyse en imagerie (automatisation des taches par
Hybridation in situ

Entreprises

  • CNRS UMR 5297 - Ingénieur d'étude

    2011 - maintenant L’équipe dans laquelle je me suis intégrée étudie le lien entre la synapse et la cognition en travaillant sur un modèle de retard mental de souris transgéniques.

    Missions:
    - Lab manager
    - Mise en œuvre des techniques d’immunohistochimie, d'hybridation in situ et de traitement des données sur des échantillons biologiques pour répondre aux questions du projet scientifique de l’équipe.

    Activités:
    - Réalisation et mise au point des marquages immunohistochimiques sur tissu fixé de souris sauvages et transgéniques.
    - Acquisition en microscopie à fluorescence et à balayage.
    - Développement de techniques d’analyse en imagerie (Ecriture de macro pour automatiser les taches et utilisations de pluggin).
    - Mise en place de la technique d'hybridation in situ sur mRNA et miRNA.
    - Réalisation de cultures primaires de neurones.
    - Gestion des besoins de l'équipe (Suivi des stocks, réalisation des commandes) et suivi du budget de l'équipe sur les différentes lignes de crédits.
    - Organisation des déplacements pour les manifestations scientifiques et gestion des remboursements des frais générés.
    - Mise en place des règles d’hygiène et sécurité en tant que référente de l’équipe en lien avec les agents de prévention de l’UMR.
    - Référante laser.
    - Référent éthique auprès de la responsable de l’expérimentation animale pour le suivi éthique de notre activité et la mise en application de la directive 2010/EU/63.
    - Suivi des microscopes biphotonique et à épifluorescence de l’équipe (suivi de l’utilisation des équipements, maintenance et gestion des interventions techniques, formation des nouveaux utilisateurs).

  • CNRS UMR 5297 - Stagiaire

    2011 - 2011 Caractérisation des aspects de la motilité des prolongements microgliaux après un status epilepticus.

    Utilisation de la microscopie biphotonique sur tranches aigües d’hippocampe de souris pour tester si l’activation microgliale provoquée par un status epilepticus (injection intrapéritonéale de kaïnate) induisait une augmentation généralisée de sa motilité.

    Utilisation d'un système d’acquisition biphotonique non commercial ce qui m’a permis de m’impliquer dans la " construction " et l’optimisation de ce microscope, de proposer des solutions et d’acquérir une routine expérimentale afin de maitriser les différents paramètres (vérification de la puissance délivrée par le laser, alignement des miroirs …) afin de résoudre les problèmes rencontrés.

    Développement de mes aptitudes dans l’analyse d’images, en utilisant des programmes développés sur Matlab, j’ai pu automatiser le traitement de mes acquisitions. De même, l’usage du logiciel ImageJ m’a permis de quantifier la motilité de la microglie.

    Sensibilisation à l’expérimentation animale et l’éthique car le protocole utilisé nécessitait un suivi régulier de l’animal.

  • CNRS UMR 6026 - Stagiaire

    2010 - 2010 Mise au point un modèle d’ictogénèse sur tranches aigües d’hippocampe afin d’imager l’activation neuronale.

    Ce projet couplait deux approches, in vivo et in vitro, en parallèle d’étude cliniques afin d’améliorer les procédures thérapeutiques des épilepsies pharmaco-résistantes du lobe temporal.
    Mon but était donc d’obtenir un modèle in vitro (tranches aigües d’hippocampe de rat) présentant des marqueurs électrophysiologiques du foyer épileptique mis en évidence in vivo (modèle animaux d’épileptogenèse, enregistrements intracérébraux humains) et appelés Oscillation Très Haute Fréquence (OTHF).
    En combinant des techniques d’électrophysiologie de champ et de microscopie à haute résolution (microscopie biphotonique) associée aux techniques d’imagerie calcique (sonde fluorescente calcium dépendante), j’ai imagé
    l’activation de groupes de neurones pendant la génération d’OTHF au sein de tranches aigües de cerveau de rat. Ces résultats m’ont permis d’établir une corrélation entre la génération de ces oscillations et l’activation de groupes de neurones.

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