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Institut de Recherche Medecine régénérative et Biothérapies (IRMB)
- Ingénieur d'Etudes
2016 - maintenant
- Équipe : Jean-Marc Lemaitre "Plasticité des génomes et des cellules souches dans le développement et le vieillissement"
- Projet Pierre Fabre : "Influence de l'environnement cellulaire sur la senescence des cellules de la peau"
- Extraction de fibroblastes papillaires/kératinocytes humains à partir de biopsies de peau (mammaire, abdominale) pour la création de banques cellulaires (selon différentes tranches d'âges de patients : jeune, moyen, âgé)
- Purification, dosage, marquage des exosomes
- Culture cellulaire (primaire : fibroblastes papillaires & kératincytes humains + WI38/3T3-J2/MEF)
- Stress cellulaire, utilisation hypoxycool (conditionnement de milieu de culture en %O2), manipulation sous ruskinn (PSM à atmosphère contrôlée)
- Obtention et extraction de MEF (fibroblastes embryonnaires de souris)
- Test bétagalactosidase (senescence)
- Expé animale souris : injections (i.v ; i.p ; s.c), dissections, prélèvements histologiques d'organes (peau, cœur, rein, rate, poumon, intestin, cerveau, cochlée, muscles), biopsie peau, prise de sang, , ponctions intracardiaques, instillation intratrachéale à la bléomycine (induction fibrose pulmonaire), test de régénération (perçages oreilles souris + repousse des poils), test de tolérance au glucose/à l’insuline
- Extraction ADN à partir de biopsie souris + Génotypage souris lignées OGM (progéria, souris reprogrammables)
- Microscopie à fluorescence
- Westernblot
- Encadrement technique de doctorants de l'équipe
* Formation de chirurgie du rongeur
* Formation autopsie & Histologie du rongeur
* Communication :
Poster ISSCR 2019 : IMANIPULATING CELL FATE TO IMPROVE TISSUE REGENERATION DURING AGING
Alle, Quentin, Bechir, Nelly, Gabanou, Melissa, Lemey, Camille, Le Borgne, Enora, Lemaitre, Jean-Marc, Milhavet, Ollivier - IRMB - INSERM U1183, French National Institute of Health and Medical Research (Inserm), Montpellier, France
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Institut de Recherche en Cancérologie de Montpellier (IRCM)
- Technicienne de Recherche
2015 - 2016
- Équipe : Céline Gongora "Résistance aux traitements et thérapies innovantes".
- Projet : Recherche pré-clinique (contrat pharmaceutique : Astellas Pharma) - Cancer de la Prostate
- Travail en laboratoire P2, culture cellulaire (lignées cellulaires de cancer de la prostate). Création de lignées résistantes, clonage.
- Préparation d'extraits protéiques, WesternBlot.
- Combinaisons de drogues : SRB test (cytotoxicité), matrices de survie/synergie.
- Analyse du kinome : automate pamstation.
- Expérimentation animale (xénogreffes, souris Nod/Scid et Nude, injections i.p., gavages, mesures tumeurs, prélèvement tumeurs).
- Publication : Tosi et al., BCM Cancer, 2018. "Rational development of synergistic combinations of chemotherapy and molecular targeted agents for colorectal cancer treatment".
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ATOXIGEN
- Stage Ingénieur (M2P Biotox)
2014 - 2014
ATOXIGEN est une CRO spécialisée dans les tests de génotoxicologie in vitro de produits pharmaceutiques, cosmétiques, chimiques.
-6 mois-
- SUJET : Validation de la méthode du test des Micronoyaux in vitro (OCDE 487) et création d'un historique des valeurs témoins positives et négatives selon les BPL. Sélection des doses optimales en témoins positifs.
- Culture cellulaire (travail en laboratoire P2) : lignées/primaires : entretien, congélation, décongélation),
- Test des micronoyaux in vitro (OCDE487) : exposition des cellules à différentes concentrations en témoins positifs pour choix de la concentration optimale dans différentes conditions du test (temps court/long avec/sans activation métabolique), inhibition de la cytodiérèse par un agent de blocage, préparation des lames (fixation), coloration histo, lecture et comptage au microscope
- Test cytotoxicologie : MTT (sel de tétrazolium MTT)
- Participation à un projet d'épiderme reconstitué : mise en culture des cellules de peau humaine à partir de déchets opératoires (prépus)
- Métrologie (températures enceintes thermiques, CO2, micropipettes, bactériologie), autoclave.
* Travail Bibliographique (Anglais) + Rédaction de modes opératoires + Cahier de Laboratoire + Rapport Ecrit + Présentation Orale devant un jury.
* Formation aux BPL (Bonnes Pratiques de Laboratoire)
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Université Paul Sabatier, Toulouse III
- Etudiante en Master 2 Professionnel BIOTOX (Biologie Intégrative & Toxicologie)
2013 - 2014
Le Master BioTox forme aux méthodes d'explorations fonctionnelles in vivo et in vitro, à l'application de ces méthodes et à l'évaluation des risques liés à l'utilisation des xénobiotiques.
Objectifs scientifiques et techniques :
- Techniques d'investigation physiologique : expérimentation animale, comportement, pharmacologie, électrophysiologie, imagerie, microscopie.
- Utilisation du modèle animal et les méthodes in vitro en conformité avec les exigences réglementaires et la bioéthique.
- Appliquer les techniques à la conduite des essais pharmaco-toxicologiques (évaluation des risques pour l'Homme) et écotoxicologiques.
- Former aux aspects juridiques / réglementaires en R&D
- Communiquer / rechercher l'information, appliquer la démarche qualité.
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INRA - UMR 1331 TOXALIM / EI PURPAN
- Assistante Recherche (stage diplôme DESUPS)
2012 - 2013
TOXALIM contribue à l'élaboration de connaissances sur les effets à long terme en santé humaine et animale de toxiques, tels que intrants agricoles, pesticides, mycotoxines, migrats d’emballage et autres contaminants alimentaires.
-8 mois-
- ÉQUIPE NGN : Neurogastroentérologie & Nutrition
- SUJET : Évaluation de l'impact oestrogénique d'un contaminant alimentaire, le bisphénol A (BPA) et de son substitut, le bisphénol S (BPS) sur la perméabilité de la barrière intestinale du rat nouveau-né.
Expérimentation animale (commandes animaux, planification reproductions, entretien cages, contention, gavage, prise de sang, injection s.c/i.p, euthanasie CO2, dissection), finalisation du protocole d'exposition, mesure de la perméabilité totale de la barrière intestinale par dosage spectrophotométrique du Dextran-FITC plasmatique (Infinite M200, Tecan), après traitements par gavage (oestrogène (hormone de référence) / BPA et BPS), détermination de la relation dose/réponse sur la perméabilité intestinale : création de courbes dose/réponse (oestrogène / BPA et BPS). Vérification de l'implication des récepteurs nucléaires aux œstrogènes dans le mécanismes de modulation de la perméabilité intestinale à l'aide d'un agent pharmacologique.
+ Aide doctorante, sujet : Effets d'un stress de séparation maternelle sur l'intégrité de la barrière intestinale et sur le transcriptome hépatique chez le nouveau-né.
- Publication : Moussaoui et al., Fev 2014, PLos One. Changes in intestinal glucocorticoid sensitivity in early life shape the risk of epithelial barrier defect in maternal-deprived rats. Expérimentation animale, extraction de protéines et d'ARNm à partir des différents segments intestinaux, RT et q-PCR, westernblot.
* Travail Bibliographique (Anglais) + Rédaction Cahier de Laboratoire + Rapport Ecrit + Présentation Orale devant un jury.
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UMR 444 INRA/ENVT - Laboratoire de Génétique Cellulaire
- Stage en recherche
2011 - 2011
-2 mois-
- SUJET : Epigénétique et Infertilité : comparaison de la méthylation de l'ADN entre porcs sains et porcs présentant des problèmes de fertilité dans un but d'amélioration agronomique.
Design d'amorces PCR, Extraction d'ADNg à partir de semence de porc, MeDIP
(immunoprécipitation d'ADN méthylé), PCR/q-PCR, gel d'électrophorèse.
* Travail Bibliographique (Anglais) + Rédaction Rapport Ecrit + Présentation Orale devant un jury.
